ANTICUERPOS DE DOMINIO ÚNICO MODIFICADOS

Solicitante

Inventores (4)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente divulgación proporciona anticuerpos de dominio único que comprenden una o más modificaciones, por ejemplo, en el carboxi-terminal (término C), que pueden reducir la unión de anticuerpos antifármacos al carboxi-terminal de los anticuerpos de dominio único en comparación con un anticuerpo de dominio único no modificado. La solicitud también proporciona proteínas de fusión y conjugados que comprenden los anticuerpos de dominio único, polinucleótidos y vectores recombinantes que codifican los anticuerpos de dominio único, composiciones y kits que los comprenden, así como células huésped y métodos para preparar los anticuerpos de dominio único. Reivindicación 1: Un anticuerpo de dominio único modificado para comprender, en el carboxi-terminal a partir de la posición 111 según Chothia, una secuencia de aminoácidos seleccionada entre (1) V, (2) VX1, (3) VX1X2, (4) VX1X2G o (5) VX1X2P; donde X1 se selecciona entre los aminoácidos Ala (A), Asp (D), Glu (E), Gly (G), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Pro (P), Arg (R), Ser (S), Thr (T), y Val (V), y X2 se selecciona entre los aminoácidos Ala (A), Asp (D), Glu (E), Gly (G), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Pro (P), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T) y Val (V). Reivindicación 14: Un anticuerpo de dominio único modificado para comprender una o más sustituciones de aminoácidos en las posiciones 11, 13, 87, 88, 89 y/o 108, en donde (a) Leu (L) en la posición 11 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (b) Gln (Q) en la posición 13 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (c) Thr (T) en la posición 87 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Val (V) o Tyr (Y); (d) Gly (G) en la posición 88 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (e) Val (V) o Ile (I) en la posición 89 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T) o Tyr (Y); y/o (f) Leu (L) o Gln (Q) en la posición 108 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Asn (N), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y). Reivindicación 28: Una proteína de fusión que comprende uno o más de los anticuerpos de dominio único de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27, en la que al menos un anticuerpo de dominio único está en el carboxi-terminal de la proteína de fusión. Reivindicación 29: Un conjugado que comprende el anticuerpo de dominio único de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27 o la proteína de fusión de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el anticuerpo de dominio único o la proteína de fusión se conjuga con una segunda fracción. Reivindicación 30: Una molécula polinucleotídica que codifica el anticuerpo de dominio único de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27 o la proteína de fusión de acuerdo con la reivindicación 28. Reivindicación 31: Un vector recombinante que comprende la molécula polinucleotídica de acuerdo con la reivindicación 30. Reivindicación 32: Una célula huésped que comprende la molécula polinucleotídica de acuerdo con la reivindicación 30, o el vector recombinante de acuerdo con la reivindicación 31. Reivindicación 34: Un método para producir un anticuerpo de dominio único o una proteína de fusión que comprende expresar la secuencia polinucleotídica de acuerdo con la reivindicación 30 o el vector recombinante de acuerdo con la reivindicación 31 en una célula huésped. Reivindicación 35: Una composición que comprende el anticuerpo de dominio único de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 27, la proteína de fusión de acuerdo con la reivindicación 28, el conjugado de acuerdo con la reivindicación 29, la molécula polinucleotídica de acuerdo con la reivindicación 30, o el vector recombinante de acuerdo con la reivindicación 31, y al menos un portador, diluyente o excipiente. Reivindicación 36: Un método de modificación de un anticuerpo de dominio único, comprendiendo el método mutar la secuencia de aminoácidos, en el carboxi-terminal del anticuerpo de dominio único a partir de la posición 111 según Chothia, a una secuencia de aminoácidos seleccionada entre (1) V, (2) VX1, (3) VX1X2, (4) VX1X2G o (5) VX1X2P; donde X1 se selecciona entre los aminoácidos Ala (A), Asp (D), Glu (E), Gly (G), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Pro (P), Arg (R), Ser (S), Thr (T), y Val (V), y X2 se selecciona entre los aminoácidos Ala (A), Asp (D), Glu (E), Gly (G), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Pro (P), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T) y Val (V). Reivindicación 49: Un método para modificar un anticuerpo de dominio único, comprendiendo el método introducir en el anticuerpo de dominio único una o más sustituciones de aminoácidos en las posiciones 11, 13, 87, 88, 89 y/o 108, en donde (a) Leu (L) en la posición 11 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (b) Gln (Q) en la posición 13 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (c) Thr (T) en la posición 87 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Val (V) o Tyr (Y); (d) Gly (G) en la posición 88 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y); (e) Val (V) o Ile (I) en la posición 89 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Lys (K), Leu (L), Asn (N), Gln (Q), Arg (R), Ser (S), Thr (T) o Tyr (Y); y/o (f) Leu (L) o Gln (Q) en la posición 108 se muta a Ala (A), Asp (D), Glu (E), Ile (I), Lys (K), Asn (N), Arg (R), Ser (S), Thr (T), Val (V) o Tyr (Y).