ARN INHIBIDOR DIRIGIDO A LA EXPRESIÓN DE HUNTINGTINA

Solicitante

Inventores (6)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente invención presenta constructos polinucleotídicos de ARN que comprenden secuencias dirigidas al ARNm de la huntingtina, constructos polinucleotídicos que comprenden una secuencia que codifica para dichos constructos de ARN y andamiajes primarios de microARN. Los constructos que comprenden secuencias dirigidas al ARNm de la huntingtina y/o que codifican para secuencias dirigidas al ARNm de la huntingtina pueden utilizarse, por ejemplo, para inhibir la expresión de la HTT mutante y/o tratar la enfermedad de Huntington. Reivindicación 1: Un polinucleótido de ARN que comprende una secuencia de ARN diana al menos un 80% idéntica a la secuencia de cualquiera de las SEQ ID Nº 1 - 19; siempre que si la secuencia diana es al menos un 80% idéntica a la SEQ ID Nº 18, entonces el polinucleótido de ARN es (a) un pri-amiARN que comprende la secuencia diana incrustada en un andamiaje seleccionado entre un andamiaje S155e, un andamiaje S-26a y un andamiaje S-33; o (b) el polinucleótido de ARN comprende la secuencia de las SEQ ID Nº 117 o 118. Reivindicación 19: Un ARN inhibidor opcionalmente modificado que comprende (a) una cadena guía capaz de hibridarse con la secuencia diana de cualquiera de los Nº DE ID SEQ: 119 - 137; y (b) una secuencia pasajera sustancialmente complementaria; en la que uno o más nucleótidos de la cadena guía y de la cadena pasajera son ARN opcionalmente modificados. Reivindicación 20: Un polinucleótido que comprende una secuencia de ácido nucleico que codifica el polinucleótido de ARN de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 19. Reivindicación 21: Un casete de expresión que comprende una secuencia de ácido nucleico que codifica el polinucleótido de ARN de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 19, y uno o más elementos de control de la expresión unidos de forma operable a la secuencia de ácido nucleico que codifica el polinucleótido de ARN. Reivindicación 29: Un ácido nucleico de vector viral recombinante que comprende el casete de expresión de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 28, y elementos virales 5’ y/o 3’ que proporcionan empaquetamiento y/o replicación viral. Reivindicación 35: Un nucleótido viral recombinante que comprende una secuencia de cualquiera de las SEQ ID Nº 237 - 242. Reivindicación 36: Un vehículo de administración que comprende un vector viral o no viral y el ARN inhibidor de la reivindicación 19, el polinucleótido de la reivindicación 20, el casete de expresión de cualquiera de las reivindicaciones 21 - 28 o el ácido nucleico del vector viral recombinante de cualquiera de las reivindicaciones 29 - 35. Reivindicación 44: Una composición farmacéutica que comprende el ARN inhibidor de la reivindicación 19, el polinucleótido de la reivindicación 20, el casete de expresión de cualquiera de las reivindicaciones 21 - 28, el ácido nucleico del vector viral recombinante de cualquiera de las reivindicaciones 29 - 35, o el vehículo de administración de cualquiera de las reivindicaciones 36 - 43 y un portador farmacéuticamente aceptable. Reivindicación 50: Un plásmido genómico de vector AAV que comprende el ácido nucleico viral recombinante de cualquiera de las reivindicaciones 30 - 35. Reivindicación 52: Un método de producción de un vector de rAAV que comprende el paso de cultivar una línea celular de empaquetamiento de rAAV que comprende una actividad de virus ayudante de rAAV, en el que el genoma de dicha célula de producción comprende el ácido nucleico de cualquiera de las reivindicaciones 30 - 35, un gen rep y un gen cap, en el que se produce dicho vector de rAAV. Reivindicación 53: Un método de producción de un vector de rAAV que comprende el paso de cultivar una célula permisiva de rAAV que comprende el plásmido genómico de rAAV de la reivindicación 51, en el que la célula permisiva de rAAV comprende además (a) genes rep y cap proporcionados bien como parte del genoma celular y/o por uno o más plásmidos separados, y (b) actividad de virus ayudante proporcionada por el genoma celular y/o proporcionada por uno o más plásmidos separados. Reivindicación 56: Un método de obtención de un vector rAAV que comprende las etapas de (a) producir el vector rAAV utilizando el método de cualquiera de las reivindicaciones 52 - 55 y (b) purificar el vector rAAV. Reivindicación 57: Un polinucleótido que comprende la secuencia de ARN de SEQ ID Nº 255 en la que N01 a N42 son ribonucleótidos, N01 es complementario de N42, N02 no es complementario de N41, N03-N10 es complementario de N33-N40, N11 no es complementario de N32, y N12-N21 es complementario de N22-N31; o el ADN correspondiente. Reivindicación 59: Un polinucleótido de ADN que comprende en dirección 5’ a 3’ (a) una secuencia 5’ de repetición terminal invertida (ITR) que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 262; (b) un promotor CAG; una secuencia codificadora de pre-amiARN que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 261, en la que el promotor CAG está vinculado operativamente a la secuencia codificadora de pre-amiARN; (c) y una señal de poliadenilación; y (d) una secuencia 3’ de repetición terminal invertida (ITR) que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 263. Reivindicación 65: Un vector viral adenoasociado recombinante (rAAV) que comprende: (a) el ácido nucleico rAAV de la reivindicación 64, y (b) una cápside de rAAV que comprende: VP1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ Administración Nacional de Patentes (ANP) - Información Tecnológica - Publicaciones 50 BOLETÍN DE PATENTES Nº 1458 - 27 De Agosto De 2025 ID Nº 257, VP2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 258, y VP3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 259. Reivindicación 66: Un vector viral adenoasociado recombinante (rAAV) que comprende: (a) un ácido nucleico rAAV que comprende una secuencia codificante de pre-amiARN que comprende la secuencia de SEQ ID Nº 261 unida operablemente a un promotor aguas arriba y a un poliA aguas abajo, y (b) una cápside de rAAV que comprende: VP1 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 257, VP2 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 258, y VP3 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 259. Reivindicación 67: Una composición farmacéutica que comprende aproximadamente 1,0  1010 vg a aproximadamente 1,0  1013 vg del vector rAAV de la reivindicación 65 o 66, y un portador farmacéuticamente aceptable.