COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA LA HIDRÓLISIS DE FENOLES VOLÁTILES LIGADOS GLICOSÍDICAMENTE ASOCIADOS AL HUMO

Solicitante

Inventores (5)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente divulgación proporciona composiciones para hidrolizar fenoles volátiles a partir de glicósidos fenólicos. La divulgación también proporciona métodos para utilizar las composiciones para hidrolizar fenoles volátiles para eliminar fenoles volátiles de productos de fruta, incluidos productos de fruta fermentados. También se proporcionan aquí métodos para medir fenoles volátiles en productos de frutas, incluidos productos de frutas fermentadas. Reivindicación 1: Una composición para hidrolizar fenoles volátiles asociados al humo a partir de un glicósido fenólico que comprende: (i) una enzima hidrolizante de glucósido y/o gentiobiósido que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 1 - 72; y (ii) una rutinosidasa que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 73 - 77. Reivindicación 14: Una composición para hidrolizar fenoles volátiles asociados al humo a partir de un glicósido fenólico que comprende: (i) una enzima hidrolizante de glucósido y/o gentiobiósido que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 1 - 72; y (ii) una rutinosidasa que comprende una secuencia de aminoácidos con una mutación en una o más de las posiciones 141, 190, 279, 307, 38, 39, 41, 87, 94, 145, 156, 168, 181, 183, 184, 214, 270, 276, 297, 324, 328 y/o 342 de NRO. de ID de SEC.: 73. Reivindicación 30: Un polipéptido aislado que comprende una mutación en una o más de las posiciones 141, 190, 279, 307, 38, 39, 41, 87, 94, 145, 156, 168, 181, 183, 184, 214, 270, 276, 297, 324, 328 y/o 342 de NRO. de ID de SEC.: 73. Reivindicación 36: Un método para hidrolizar fenoles volátiles asociados al humo a partir de glicósidos fenólicos en un producto de fruta o un producto fermentado del mismo que comprende incubando el producto de fruta o un producto fermentado del mismo con la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29 o el polipéptido aislado de cualquiera de las reivindicaciones 30 a 35, en donde el producto de fruta o el producto fermentado del mismo está expuesto al humo. Reivindicación 48: Un método para cuantificar un fenol volátil y/o un glicósido fenólico en un producto de fruta o un producto fermentado del mismo que comprende: incubar el producto de fruta o un producto fermentado del mismo con la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29 o el polipéptido aislado de cualquiera de las reivindicaciones 30 a 35; y medición de los niveles de fenol volátil y/o un glicósido fenólico mediante espectrometría de masas. Reivindicación 61: Una célula diseñada para expresar: (i) una enzima hidrolizante de glucósido y/o gentiobiósido que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 1 - 72; y/o (ii) una rutinosidasa que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 73 - 77. Reivindicación 63: Una célula diseñada para expresar un polipéptido que comprende una mutación en una o más de las posiciones 141, 190, 279, 307, 38, 39, 41, 87, 94, 145, 156, 168, 181, 183, 184, 214, 270, 276, 297, 324, 328 y/o 342 de NRO. de ID de SEC.: 73. Reivindicación 64: Una célula diseñada para expresar: (i) una enzima hidrolizante de glucósido y/o gentiobiósido que comprende una secuencia de aminoácidos con al menos un 85% de identidad de secuencia con NRO. de ID de SEC.: 1 - 72; y/o (ii) una rutinosidasa que comprende una secuencia de aminoácidos con una mutación en una o más de las posiciones 141, 190, 279, 307, 38, 39, 41, 87, 94, 145, 156, 168, 181, 183, 184, 214, 270, 276, 297, 324, 328 y/o 342 de NRO. de ID de SEC.: 73. Reivindicación 70: Un método para hidrolizar fenoles volátiles asociados al humo a partir de glicósidos fenólicos de un aparato de fermentación de frutas y/o un recipiente de fermentación de frutas que comprende: incubar el aparato de fermentación de frutas y/o el recipiente de fermentación de frutas con la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29 o el polipéptido aislado de cualquiera de las reivindicaciones 30 a 35. Reivindicación 72: Una composición de materia que comprende una bebida derivada de frutas y niveles de volátiles asociados al humo seleccionados entre: guayacol, 4-metilguayacol, 4-etilguayacol, p-cresoles, m-cresoles, o-cresoles, fenol, 4-etilfenol, siringol y/o 4-metilsiringol, en niveles superiores a 37,0 g/l (p. ej., hasta 50, 100 o 200 g/l), 6,2 g/l (p. ej., hasta 20, 50, 100 o 200 g/l), 0,5 g/l (p. ej., hasta 10, 50, 100 o 200 g/l), 16,3 g/l (p. ej., hasta 50, 100 o 200 g/l), 26,2 g/l (p. ej., hasta 50, 100 o 200 g/l), 23,5 g/l (p. ej., hasta 50, 100 o 200 g/l), 79,1 g/l (p. ej., hasta 100 o 200 g/l), 6,2 g/l (p. ej., hasta 20, 50, 100 o 200 g/l), 51,2 g/l (p. ej., hasta 100 o 200 g/l), 4,1 g/l (p. ej., hasta 10, 20, 50, 100 o 200 g/l), respectivamente. Reivindicación 73: Una composición de materia que comprende una bebida derivada de frutas y niveles de volátiles asociados al humo seleccionados entre: guayacol, 4-metilguayacol, 4-etilguayacol, p-cresoles, m-cresoles, o-cresoles, fenol, 4-etilfenol, siringol y/o 4-metilsiringol, encontrados en niveles superiores a 2,2 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 0,3 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 0,1 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 1,1 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 1,1 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 1,6 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 7,4 g/l (p. ej., hasta 510, 25, 0, 100 o 200 g/l), 0,3 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), 31,1 g/l (p. ej., hasta 50, 100 o 200 g/l), 0,3 g/l (p. ej., hasta 10, 25, 50, 100 o 200 g/l), respectivamente.