COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA PRODUCIR POLIRRIBONUCLEÓTIDOS CIRCULARES

Solicitante

Inventores (2)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente divulgación se refiere, en general, a composiciones y métodos para producir, purificar y usar ARN circular. Reivindicación 1: Un polirribonucleótido lineal que tiene la fórmula 5’-(A)-(B)-(C)-(D)-(E)-(F)-(G)-3’, en donde: (A) comprende una mitad 3’ del fragmento del intrón catalítico del Grupo I de un gen nrdB o gen nrdD del fago T4; (B) comprende un sitio de corte y empalme 3’; (C) comprende un fragmento del exón 3’; (D) comprende una carga polirribonucleotídica; (E) comprende un fragmento del exón 5’; (F) comprende un sitio de corte y empalme 5’; y (G) comprende una mitad 5’ del fragmento del intrón catalítico del Grupo I de un gen nrdB o gen nrdD del fago T4; y en donde (A), (B) o (C) comprende una primera región de hibridación que comprende de 4 a 50 ribonucleótidos y (E), (F) o (G) comprende una segunda región de hibridación que comprende de 4 a 50 ribonucleótidos, en donde la primera región de hibridación y la segunda región de hibridación tienen del 80% al 100% de complementariedad, o la primera región de hibridación y la segunda región de hibridación comprenden de cero a 10 pares de bases emparejados erróneamente. Reivindicación 51: Un vector de ADN que comprende un promotor de la ARN polimerasa unido operativamente a una secuencia de ADN que codifica el polirribonucleótido lineal de una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 50. Reivindicación 52: Un polirribonucleótido circular producido a partir del polirribonucleótido lineal de una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 50 o del vector de ADN de la reivindicación 51. Reivindicación 53: Un método de expresión de un polipéptido en una célula, comprendiendo el método proporcionar el polirribonucleótido lineal de una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 50, el vector de ADN de la reivindicación 51 o el polirribonucleótido circular de la reivindicación 52 a la célula. Reivindicación 54: Un método de producción de un polirribonucleótido circular a partir del polirribonucleótido lineal de una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 50, comprendiendo el método proporcionar el polirribonucleótido lineal en condiciones adecuadas para el autocorte y empalme del polirribonucleótido lineal para producir el polirribonucleótido circular.