AR133664 A1 Sol. P240102279 Patente publicada en INPI
EDICIÓN DE CALIDAD DE CRISPR-CAS DE CLASE 2 TIPO V
Inventores (4)
De Vleesschauwer, David
Meulewaeter, Frank
Kuijpers, Anne-marie
Staals, Raymond Hubert
Clasificación Internacional de Patentes (IPC)
Resumen técnico
En el campo de la edición del genoma génico, se proporciona un sistema de edición de calidad de CRISPR-Cas de Clase 2 Tipo V, que incluye un editor de calidad, complejo editor de calidad, un sistema de ARN guía de edición de calidad, así como el medio y los métodos para la modificación de una secuencia de ácido nucleico de interés con el sistema de edición de calidad de la presente invención. Reivindicación 1: Un complejo editor de calidad caracterizado porque comprende (a) al menos un sistema de ARN de guía de edición de calidad (pegARN) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 11 a 18; y (b) al menos un editor de calidad de Cas12a que comprende (i) al menos una enzima Cas12a, preferentemente que tenga actividad nickasa (nCas12a), con mayor preferencia que tenga actividad nickasa de cadena no diana (NTS), o un fragmento activo de esta; (ii) al menos una transcriptasa inversa o un fragmento activo de esta; (iii) opcionalmente: al menos un ligador que liga de forma covalente o no covalente la al menos una enzima Cas12a, o un fragmento de esta y la al menos una transcriptasa inversa, o un fragmento activo de esta; y (iv) opcionalmente: al menos una señal de localización organular. Reivindicación 11: Un sistema de ARN guía de edición de calidad (pegARN) caracterizado porque comprende las partes (i) una secuencia de andamio de CRISPR-Cas de clase 2 de tipo V; (ii) una secuencia espaciadora; (iii) opcionalmente una secuencia ligadora; (iv) una plantilla de transcriptasa inversa que tiene una longitud de 9 a 150 nucleótidos; (v) un sitio de unión al cebador que tiene una longitud de 5 a 50 nucleótidos; y (vi) opcionalmente una segunda secuencia de andamio, opcionalmente en donde la secuencia es la misma que la primera secuencia de andamio; en donde el sitio de unión al cebador es complementario a la cadena no diana. Reivindicación 24: Una molécula de ácido nucleico o más de una molécula de ácido nucleico caracterizada porque codifica el complejo de editor de calidad de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10; y/o el sistema de pegARN de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 18; y/o el editor de calidad de Cas12a de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23. Reivindicación 31: Un constructo o vector de expresión, o más de un constructo o vector de expresión, caracterizado porque comprende la una o más moléculas de ácido nucleico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 24 a 30. Reivindicación 32: Una célula caracterizada porque comprende: el complejo de editor de calidad de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10; y/o el sistema de pegARN de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 18; y/o el editor de calidad de Cas12a de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23; y/o una molécula de ácido nucleico, o más de una molécula de ácido nucleico, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 24 a 30; y/o el constructo o vector de expresión, o más de un constructo o vector de expresión, de acuerdo con la reivindicación 31.