ESTRATEGIAS DE INGENIERÍA DE VECTORES PARA MEJORAR LA PRODUCTIVIDAD VOLUMÉTRICA Y DISMINUIR LA FORMACIÓN DE IMPUREZAS EN UN CONJUNTO DIVERSO DE MODALIDADES

Solicitante

Inventores (6)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

Se divulgan en el presente documento casetes de expresión, vectores de expresión, sistemas de vectores duales y células huésped de mamífero, incluyendo pero no limitándose a células de ovario de hámster chino (CHO), que comprenden lo anterior, para la expresión de ciertas modalidades de anticuerpos, en el que cada vector de expresión emplea un conjunto promotor optimizado para la modalidad de anticuerpo. También se divulgan en el presente documento métodos de producción de ciertas modalidades de anticuerpos utilizando estas células huésped de mamífero. Reivindicación 1: Un casete de expresión que comprende una secuencia polinucleotídica que comprende los siguientes elementos en orden 5’ a 3’: a) una primera copia de un promotor de GAPDH unido de forma operable a una secuencia de nucleótidos que codifica una primera cadena de anticuerpos o una fusión de cadenas de anticuerpos seguida de una primera secuencia señal polyA; b) una segunda copia del promotor de GAPDH unida de forma operable a una secuencia de nucleótidos que codifica una segunda cadena de anticuerpos o fusión de cadenas de anticuerpos seguida de una segunda secuencia señal polyA; y c) un promotor unido de forma operable a una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador seleccionable seguido de una tercera secuencia señal polyA, en el que, cuando la primera cadena de anticuerpos o fusión de cadenas de anticuerpos es una cadena ligera de anticuerpos, la segunda cadena de anticuerpos o fusión de cadenas de anticuerpos es una cadena pesada de anticuerpos o fusión de cadenas pesadas de anticuerpos, en el que, cuando la primera cadena de anticuerpos o fusión de cadenas de anticuerpos es una cadena pesada de anticuerpos o fusión de cadenas pesadas de anticuerpos, la segunda cadena de anticuerpos o fusión de cadenas de anticuerpos es una cadena ligera de anticuerpos, y en el que la fusión de cadena pesada del anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en una fusión de cadena pesada-scFv, una fusión de cadena pesada-citocina y una fusión de cadena pesada VH. Reivindicación 20: Un vector de expresión que comprende un casete de expresión de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 19. Reivindicación 21: Un par de vectores de expresión, en el que: 1) el primer vector de expresión comprende un casete de expresión que comprende una secuencia polinucleotídica que comprende los siguientes elementos en orden 5’ a 3’: a) una primera copia de un promotor de GAPDH unido de forma operable a una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera de anticuerpo seguida de una primera secuencia señal polyA; b) una segunda copia del promotor de GAPDH enlazada operablemente a una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada de anticuerpos seguida de una segunda secuencia señal polyA; y c) un promotor enlazado operablemente a una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador seleccionable seguido de una tercera secuencia señal polyA; y 2) el segundo vector de expresión comprende un casete de expresión que comprende una secuencia polinucleotídica que comprende los siguientes elementos en orden 5’ a 3’: a) una primera copia de un promotor de GAPDH unido de forma operable a una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera de anticuerpo seguida de una primera secuencia señal polyA; b) una segunda copia del promotor de GAPDH enlazada operablemente a una secuencia de nucleótidos que codifica una fusión de cadena pesada de anticuerpo seguida de una segunda secuencia señal polyA; y c) un promotor enlazado operablemente a una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador seleccionable seguido de una tercera secuencia señal polyA. Reivindicación 32: Una célula huésped de mamífero que comprende un vector de expresión de la reivindicación 20 o un par de vectores de expresión de cualquiera de las reivindicaciones 21 - 31. Reivindicación 35: Un método para producir una modalidad de anticuerpo que comprende cultivar una célula huésped de mamífero de cualquiera de las reivindicaciones 32 - 34 en condiciones en las que se produce la modalidad de anticuerpo, y recuperar la modalidad de anticuerpo del cultivo.