MÉTODOS DE REPLICACIÓN DE EMBRIONES BOVINOS SIN CLONACIÓN

Solicitante

Inventores (4)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La invención se refiere a métodos, productos y composiciones útiles para la derivación de iblastoides bovinos. Se describen métodos que permiten la agregación de células madre vírgenes y la formación de iblastoides. También se proporcionan medios de agregación e iblastoides adecuados para promover la agregación de células madre vírgenes y preparar iblastoides. Los iblastoides bovinos pueden usarse para programas de selección y reproducción que incluyen la replicación de embriones preimplantacionales con características deseables y la reproducción in vitro que comprende un ciclo de reproducción transgeneracional a partir de células germinales y/o embriones parentales hasta embriones de progenie. Reivindicación 1: Un método para preparar iblastoides bovinos, comprendiendo el método: a. proporcionar una población de células madre bovinas vírgenes; b. cultivar las células madre bovinas vírgenes en medios de agregación en condiciones de agregación para producir células madre bovinas vírgenes agregadas; c. introducir un primer medio iblastoide, opcionalmente en donde el medio de agregación y las células no agregadas se eliminan antes de introducir el primer medio iblastoide; d. cultivar las células madre bovinas vírgenes agregadas en el primer medio iblastoide en condiciones hipóxicas; e. retirar el primer medio iblastoide e introducir un segundo medio iblastoide; f. cultivar las células madre bovinas vírgenes agregadas en el segundo medio iblastoide en condiciones hipóxicas para obtener los iblastoides bovinos. Reivindicación 23: Una pluralidad de iblastoides preparados utilizando el método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22. Reivindicación 24: Un método de reproducción de ganado, comprendiendo el método: a. seleccionar al menos un progenitor bovino entre una pluralidad de animales; b. obtener una pluralidad de gametos de al menos un progenitor bovino; c. crear al menos un embrión a partir de la pluralidad de gametos; d. derivar una población de células madre vírgenes de al menos un embrión; e. preparar uno o más iblastoides según el método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22; y f. seleccionar uno o más iblastoides para reproducción, opcionalmente reproducción in vitro, y/o para transferencia a hembras sustitutas receptoras para producir progenie. Reivindicación 26: Una composición de medios de agregación que comprende: un componente de reemplazo del suero; y un componente inhibidor de la proteína quinasa de espiral enrollada asociada a Rho (ROCK). Reivindicación 28: Una composición de medio iblastoide 1 que comprende: un componente de reemplazo del suero; un componente inhibidor de MEK / ERK; un componente inhibidor de TGF-1; un componente inhibidor de la vía HIPPO; y un componente inhibidor de ROCK. Reivindicación 31: Una composición de medio iblastoide 2 que comprende: un componente de reemplazo del suero; un componente inhibidor de TGF-1; un componente inhibidor de la vía HIPPO; y un componente inhibidor de ROCK.