MÉTODOS PARA LA CUANTIFICACIÓN ABSOLUTA DE ARN

Solicitante

Inventores (5)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La invención proporciona una mejora en la cuantificación absoluta de ARN mediante el método RT-qPCR con el uso de ARN de plantilla sintetizado químicamente. Reivindicación 1: Una mejora en un método de cuantificación de la cantidad de una molécula de ARN de prueba en una muestra de prueba mediante RT-qPCR, en donde la mejora comprende: a) proporcionar una o más muestras de calibración con una cantidad conocida de una molécula de ARN de control, en donde la secuencia de la molécula de ARN de control de longitud completa es al menos 95% idéntica a la secuencia de la molécula de ARN de prueba de longitud completa, y en donde las secuencias de la molécula de ARN de prueba y de la molécula de ARN de control son 100% idénticas en las porciones respectivas del cebador y de la sonda, en donde dicha molécula de ARN de control tiene una longitud de 75 - 150 bases, en donde dicho ARN de control está sintetizado químicamente y es sustancialmente puro; b) realizar la qRT-PCR en dicha una o más muestras de calibración en paralelo con la RT-qPCR en dicha muestra de prueba; c) determinar la cantidad de un producto de amplificación en la muestra de ensayo en función de la cantidad de un producto de amplificación en una o más muestras de calibración.