MÉTODOS PARA MEJORAR LA TERMOESTABILIDAD DE LOS RECEPTORES INMUNITARIOS DE PLANTAS

Solicitante

Inventores (4)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

Se proporcionan métodos para mejorar la termoestabilidad de receptores inmunitarios de plantas, particularmente proteínas de repetición rica en leucina con dominio de unión a nucleótidos. Los métodos comprenden realizar una o más sustituciones de aminoácidos en una o más posiciones predeterminadas en una -hélice en el dominio de unión a nucleótidos o en la hoja  en el dominio de repetición rica en leucina (LRR) de la proteína NLR para producir una proteína NLR termostable. Además, se proporcionan métodos para crear plantas que contengan las proteínas NLR termostables. Adicionalmente, se proporcionan las proteínas NLR termostables, así como las moléculas de ácido nucleico que codifican las proteínas NLR termostables, y las plantas y células vegetales que contienen las proteínas NLR termostables. Reivindicación 1: Un método para mejorar la termoestabilidad de una proteína de repetición rica en leucina (NLR) de unión a nucleótidos de plantas que es capaz de conferir a una planta resistencia a una enfermedad vegetal, en donde el método comprende realizar al menos una sustitución amino en una posición predeterminada en una -hélice en el adaptador de unión a nucleótidos compartido por las proteínas APAF-1, R, y el dominio CED-4 (NB-ARC) o la lámina  en el dominio de repetición rica en leucina (LRR) de la proteína NLR para producir una proteína NLR termoestable, en donde la sustitución de al menos un aminoácido: (a) genera una interacción interdominio entre un primer aminoácido en la -hélice y un segundo aminoácido en la lámina  y/o (b) elimina una interacción desestabilizadora entre el primer aminoácido en la - hélice y el segundo aminoácido en la lámina ; en donde la al menos una sustitución de aminoácidos comprende reemplazar un aminoácido en la proteína NLR por un aminoácido sustituto. Reivindicación 17: Una proteína NLR termoestable producida por el método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 16 o una molécula de ácido nucleico que codifica una proteína NLR termoestable. Reivindicación 18: Una planta o célula vegetal que comprende la proteína NLR termoestable y/o la molécula de ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 17. Reivindicación 19: Un método para mejorar la termoestabilidad de una proteína NLR en una planta, el método comprende modificar la secuencia de nucleótidos de un gen NLR que codifica la proteína NLR en al menos una célula vegetal para producir al menos una célula vegetal modificada que comprende la secuencia de nucleótidos modificada, en donde la secuencia de nucleótidos modificada codifica una proteína NLR termoestable con al menos una sustitución de aminoácidos en una posición predeterminada en una -hélice en el dominio NB-ARC o la lámina beta en el dominio LRR de la proteína NLR, en donde la al menos una sustitución de aminoácidos: (a) genera una interacción interdominio entre un primer aminoácido en la -hélice y un segundo aminoácido en la lámina  y/o (b) elimina una interacción desestabilizadora entre el primer aminoácido en la -hélice y el segundo aminoácido en la lámina ; en donde la al menos una sustitución de aminoácidos comprende reemplazar un aminoácido en la proteína NLR por un aminoácido sustituto. Reivindicación 35: Una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en: (a) la secuencia de nucleótidos establecida en la SEQ ID Nº 7, 9, u 11; y (b) una secuencia de nucleótidos que codifica la secuencia de aminoácidos establecida en la SEQ ID Nº 8, 18, o 12. Reivindicación 38: Un casete de expresión que comprende un promotor operativamente unido a la molécula de ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 35 o un vector que comprende la molécula de ácido nucleico. Reivindicación 40: Un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en: (a) la secuencia de aminoácidos establecida en la SEQ ID Nº 8, 10, o 12; y (b) la secuencia de aminoácidos codificada la secuencia de nucleótidos establecida en la SEQ ID Nº 7, 9, u 11. Reivindicación 41: Una planta o célula vegetal que comprende el polipéptido de acuerdo con la reivindicación 40.