MÉTODOS Y COMPOSICIONES PARA MEJORAR LA ESPECIFICIDAD Y EFICIENCIA DE LA EDICIÓN DE GENOMAS CON UN EDITOR DE BASES DE CITOSINA

Solicitante

Inventores (3)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente invención está dirigida a materiales y métodos mejorados relacionados con la edición de bases de citosina y adenosina de un ADN genómico. Reivindicación 1: Una composición adecuada para modificar un residuo citosina en una secuencia de ADN, caracterizada porque comprende: un dominio de unión a ADN de hebra simple (SSB), una desaminasa, una proteína Cas catalíticamente modificada, un ARN guía y, opcionalmente, uno o más inhibidores de uracilo glicosilasa (UGI) libres y/o fusionados para formar un complejo RNP de edición de bases opcionalmente con un UGI. Reivindicación 19: Una composición adecuada para modificar un residuo citosina en una secuencia de ADN, caracterizada porque comprende: una desaminasa, una proteína Cas modificada catalíticamente, un ARN guía y uno o más UGI libres para formar un complejo RNP de edición de bases con un UGI libre. Reivindicación 29: Uno o más vectores de expresión, caracterizados porque comprenden uno o más de los ácidos nucleicos de la reivindicación 28. Reivindicación 31: Un método para modificar una secuencia de ADN, caracterizado porque dicho método comprende: a) proveer, 1) un complejo RNP que comprende un dominio de unión a ADN de hebra simple (SSB), una desaminasa, una proteína Cas modificada catalíticamente y un ARN guía y, opcionalmente; 2) uno o más inhibidores de uracilo glicosilasa (UGI) libres; b) introducir dicho complejo RNP y, opcionalmente, dicho UGI libre en una célula receptora; c) en donde el ADN de dicha célula receptora incluye por lo menos un residuo citosina convertido en un residuo timina. Reivindicación 51: Un método para modificar una secuencia de ADN, caracterizado porque dicho método comprende: a) proveer, 1) un complejo RNP que comprende un péptido desaminasa, una proteína Cas modificada catalíticamente y un ARN guía; 2) uno o más inhibidores de uracilo glicosilasa (UGI) libres; b) introducir dicho complejo RNP y dicho UGI libre en una célula receptora; c) en donde el ADN de dicha célula receptora incluye por lo menos un residuo citosina convertido en un residuo timina. Reivindicación 64: Un método para introducir un UGI en una célula eucariota, caracterizado porque dicho método comprende: a) por lo menos una célula receptora y b) por lo menos un UGI unido de manera covalente a por lo menos una NLS, en donde dicho por lo menos un UGI unido de manera covalente a por lo menos una NLS forma una molécula UGI- NLS; b) transfectar la molécula UGI-NLS en dicha célula receptora.