MUTACIONES ESTABILIZADORAS DE HOMODÍMEROS PARA LA PRODUCCIÓN DE HETERODÍMEROS BICELULARES

Solicitante

Inventores (2)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente invención se refiere a métodos de producción de homodímeros que comprenden mutaciones en los dominios CH3. Dichas mutaciones aumentan la estabilidad del homodímero, lo que se traduce en un mayor rendimiento del homodímero. Dichos homodímeros se expresan y purifican por separado, y se reensamblan en heterodímeros. Reivindicación 1: Un método para producir un heterodímero, en el que el método comprende: a. expresar un primer homodímero en una primera célula, y expresar un segundo homodímero en una segunda célula; b. purificar los homodímeros primero y segundo, en el que los homodímeros primero y segundo se combinan juntos antes de purificar o después de purificar; c. someter los homodímeros primero y segundo combinados a condiciones reductoras; d. someter los homodímeros primero y segundo combinados a condiciones oxidantes; y e. obteniendo el heterodímero; y en el que el heterodímero comprende una mitad del primer homodímero (primera mitad del homodímero) y una mitad del segundo homodímero (segunda mitad del homodímero), y en el que el heterodímero comprende las siguientes mutaciones según la numeración EU: a. E356K y D399K y cualquiera de K370E, K370L, K370M, K370Q y K370T en la primera mitad del homodímero; y K392D, K409D y K439D en la segunda mitad del homodímero; b. K409R y uno de D399A, D399I, D399L, D399M, D399N, D399P, D399Q, D399S, D399T y D399V en la primera mitad del homodímero; y uno de K409A, K409I, K409L, K409M, K409N, K409P, K409Q, K409S, K409T y K409V en la segunda mitad del homodímero; c. K409R y uno de E356A, E356I, E356L, E356M, E356N, E356P, E356Q, E356S, E356T y E356V en la primera mitad del homodímero; y K409R, y uno de K439A, K439I, K439L, K439M, K439N, K439P, K439Q, K439S, K439T, K439V en la segunda mitad del homodímero; d. D399K en la primera mitad del homodímero; y K392D y K409D en la segunda mitad del homodímero; o bien e. K439D y D399K en la primera mitad del homodímero; y E356K, K392D y K409D en la segunda mitad del homodímero.