SISTEMA DE EDICIÓN DE CALIDAD DEPENDIENTE DE ARN CIRCULAR

Solicitante

Inventores (2)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

La presente invención se refiere al campo de la ingeniería genética. Específicamente, la presente invención se refiere a un sistema de edición de calidad basada en ARN circular para lograr una edición de genoma precisa y sitio-específica. Más específicamente, el sistema de edición de calidad basada en ARN circular de la presente invención utiliza otras nucleasas o enzimas de mellado distintas de Cas9 para acoplarse a la transcriptasa reversa, y realiza inserciones, deleciones y sustituciones de bases precisas en la secuencia diana en el genoma de un organismo basándose en ARN circular. La invención también se refiere a un organismo genéticamente modificado y libre de transgenes producido por el método y sus progenies. Reivindicación 1: Un sistema de edición de calidad para la modificación dirigida de una secuencia de ADN genómico de un organismo, que comprende: i) a) una nucleasa CRISPR y/o una construcción de expresión que contenga una secuencia de nucleótidos que codifique dicha nucleasa CRISPR, y una transcriptasa reversa y/o una construcción de expresión que contenga una secuencia de nucleótidos que codifique dicha transcriptasa reversa, o b) una proteína de fusión de edición de calidad y/o una construcción de expresión que contenga una secuencia de nucleótidos que codifique la proteína de fusión de edición de calidad, en donde la proteína de fusión de edición de calidad comprende una nucleasa CRISPR y una transcriptasa reversa; ii) un ARN guía de edición (ARNg) dirigido a una secuencia diana en el ADN genómico y/o una construcción de expresión que contiene una secuencia de nucleótidos que codifique dicho ARNg de edición; y iii) un ARN circular que contenga una secuencia molde de transcripción reversa (RTT) y una secuencia de sitio de unión del cebador (PBS) y/o una construcción de expresión que contenga una secuencia de nucleótidos que codifique dicho ARN circular, preferentemente, la nucleasa CRISPR no es una nucleasa Cas9 o una variante de la misma. Reivindicación 29: Un método de producción de una célula genéticamente modificada, que comprende introducir el sistema de edición de calidad de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 28 en al menos una de dicha célula, dando lugar así a la modificación de la secuencia genómica de dicha al menos una célula.