VARIANTES DE CPF1 (CAS12A) CON ACTIVIDAD MEJORADA

Solicitante

Inventores (3)

Clasificación Internacional de Patentes (IPC)

Resumen técnico

En la presente se proporcionan proteínas Cas12a variantes que comprenden al menos una mutación humana inducida. También se proporcionan proteínas de fusión que comprenden las proteínas Cas12a variantes y uno o más dominios heterólogos. También se proporcionan ácidos nucleicos asociados, construcciones de ADN, vectores, células y métodos de edición de ácidos nucleicos usando las proteínas Cas12a variantes y/o proteínas de fusión. El uso de las proteínas proporcionadas puede aumentar la frecuencia de las ediciones de ácido nucleico deseadas (por ejemplo, ediciones de SDN-1 en genomas vegetales). Reivindicación 1: Una proteína Cas12a que comprende una secuencia que es al menos 80% idéntica a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 1 y una mutación humana inducida en la posición C965. Reivindicación 6: Una proteína Cas12a que comprende una secuencia que es al menos 80% idéntica a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 2 y una mutación humana inducida en la posición C70, C1116 y/o C1190. Reivindicación 10: Una proteína Cas12a que comprende una secuencia que es al menos 80% idéntica a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 3 y una mutación humana inducida en la posición C334, C379 y/o C674. Reivindicación 14: Una proteína Cas12a que comprende una secuencia que es al menos 80% idéntica a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 4 y una mutación humana inducida en la posición C270, C583, C1068, C1099 y/o C1149. Reivindicación 21: Una proteína de fusión que comprende la proteína Cas12a de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 y un dominio heterólogo. Reivindicación 24: Un ácido nucleico que codifica la proteína Cas12a de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o la proteína de fusión de cualquiera de las reivindicaciones 21 a 23. Reivindicación 26: Una construcción de ADN que comprende un promotor unido operativamente al ácido nucleico de la reivindicación 24 o 25. Reivindicación 27: Un vector que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 24 o 25 o la construcción de ADN de la reivindicación 26. Reivindicación 28: Una célula que comprende el ácido nucleico de la reivindicación 24, la construcción de ADN de la reivindicación 26 o el vector de la reivindicación 27. Reivindicación 31: Un método para editar un ácido nucleico, comprendiendo el método: poner en contacto el ácido nucleico con (i) la proteína Cas12a de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o la proteína de fusión de cualquiera de las reivindicaciones 21 a 23 y (ii) un ARN guía que tiene una región complementaria a una porción seleccionada del ácido nucleico, lo que resulta en una edición del ácido nucleico.